Technique de FRAP
Le principe du FRAP (ou Fluorescence Recovery After Photobleaching) consiste à illuminer temporairement une portion d’un échantillon avec une forte intensité de lumière (Laser), de manière à provoquer une extinction localisée (photoblanchiment) de la fluorescence, puis à mesurer la réapparition de la fluorescence dans la zone concernée.
La réapparition de la fluorescence dans la zone photoblanchie ne peut provenir que d’autres molécules fluorescentes s’y déplaçant.
Comme la vitesse de déplacement de ces molécules est directement proportionnelle à la vitesse de diffusion de la fluorescence, le FRAP permet alors de mettre en évidence des informations sur la mobilité des molécules marqués et des protéines fluorescentes utilisées.
La technique de FRAP peut également être utilisée en combinaison avec le suivie de molécule unique.
Equipements recommandés
Caméra sCMOS, QE > 95%, 6.5µm x 6.5µm, Bruit de lecture : 1 e-, 63 im/s